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弓形体病 (弓浆虫病,弓形虫病,住血原虫病)

弓形体病检查

1.病原学检查

  (1)涂片染色法

取病变组织的体液、穿刺液,经姬姆萨氏染色可检出弓形体滋养体或假囊,且可在细胞内甚至核内查见,检出率不一。病理组织石蜡薄切片HE或PAS染色,可查见典型或不典型虫体或片段;但组织形态学变化特异性不明显。

  (2)动物接种法

以患者体液或病理组织匀浆,接种小鼠腹腔分离虫体,如第一代未检出时,应予转种,每周1次,至少4~5代未见发病,亦未查见虫体,方可终止。组织培养法亦可分离出虫体。

  此外,还可采用集虫法、组织培养法进行检查。

  2.免疫学检查

  (1)弓形体容易被美蓝染色

当加入正常人体血清时,促使抗体与细胞浆发生作用而引起细胞浆变性,变形的从虫体细胞浆不能被美蓝着色,此法又称为染色试验,可用于早期诊断。本法特异性高,被认为是标准的诊断方法。

  (2)以整个虫体为抗原检测血清中抗虫体表膜的抗体

如DT、DAT、IFAT。弓形体初次感染后,抗体很快出现,2~3个月后达高峰,可保持6个月,滴度缓降,2~3年后持续于低滴度稳定期,有的患者一生都可能检出,当激活再燃时抗体复升高。

  (3)用虫体裂解后的提取物为抗原检测胞浆成分的抗体

如间接血凝试验(IHA)、乳胶凝集试验(LAT)、酶联免疫吸附试验(ELISA)等及其改良法。但目前国内外多推崇IHA、ELISA两种方法。IHA具有较好的特异性和敏感性,但质控不严格时重复性较差。所检出抗体多在感染后1个月出现,2~4个月达高峰后缓降。ELISA系列对测定早期感染的抗体应答要早于IHA,其对特异性IgM的检出,一般认为是原发性免疫应答早期的特征,但可因抗核抗体、类风湿因子或高滴度IgG的存在而出现假阳性,且近年观察发现其能测出滴度可持续1年或更长,因而降低其结果分析意义。如脐血检出特异性IgM,则显示宫内先天性感染的存在。循环抗原的检出是病原体存在的指征。虫体在不同病期诱导患者免疫应答的抗原,其组分质与量不同,可用弓形体特异性组分识别血清抗体谱进行早期诊断。

  核酸分子杂交(Nucleic acid hybridization)、单克隆抗体 (monoclonal antibody,McAb)和聚合酶链反应(polymerase cI1ain reaction,PCR)是近年来发展起来,具有敏感、特异、检测迅速等优点的新诊断技术,在疾病的临床检测上发挥着重要作用。目前,这些技术已经广泛应用于弓形虫DNA的检测。其中,聚合酶链式反应(PCR)技术已普遍使用,虽能有效地扩增弓形体DNA(可证实仅含1pg的存在,约相当2只虫体),但是PCR技术仍然存在假阳性的问题,须全面分析临床症候,以防误导。

  3.常规检验血象,白细胞数略有增高,淋巴细胞或嗜酸性粒细胞比例增高,有时可见异型淋巴细胞。

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